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为了有效控制水稻害虫的危害,*农业科学院和华中农业大学合作,成功地获得了转Bt基因的二倍体水稻。该基因来源于苏云金芽孢杆菌,基因的表达产物Bt毒蛋白具有良好的杀虫效果。请回答:
(1)若知道Bt毒蛋白的氨基*序列,则可以推测出Bt基因的核苷*序列,但推测出的核苷*序列并不是唯一的,其原因是 。在已知Bt基因的核苷*序列之后,再通过 方法获取目的基因。
(2)获得Bt基因后,在体外可以通过 技术进行扩增,该技术需要的条件是 、酶、dNTP、模板,其中的酶是 。然后构建基因表达载体,基因表达载体中除了具的基因、启动子和终止子之外,还需具有 。
(3)将Bt基因导入水稻细胞中时不宜采用农杆菌转化法,最可能的原因是 。
(4)可采用抗虫接种实验的方法,在 水平上鉴定Bt基因在受体植株内是否成功表达。
【回答】
(1)密码子具有简并* 人工合成
(2)PCR 引物 Taq DNA聚合酶 标记基因和复制原点
(3)水稻是单子叶植物,而农杆菌对单子叶植物没有感染能力
(4)个体
【分析】基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因*法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注*法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染*体的DNA是否*入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活*鉴定等。
【解答】(1)若知道Bt毒蛋白的氨基*序列,则可以推测出Bt基因的核苷*序列,但由于密码子具有简并*,因此推测出的核苷*序列并不是唯一的。在已知Bt基因的核苷*序列之后,再通过人工合成
方法获取目的基因。
(2)体外扩增目的基因可采用PCR技术,该技术需要的条件是引物、酶、dNTP、模板,其中的酶是Taq DNA聚合酶。基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点。
(3)将Bt基因导入水稻细胞中时不宜采用农杆菌转化法,最可能的原因是水稻是单子叶植物,而农杆菌对单子叶植物没有感染能力。
(4)抗虫接种实验属于个体水平上的鉴定。
【点评】本题考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的概念、原理及*作步骤,掌握各*作步骤中需要注意的细节,能结合所学的知识准确答题。
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:综合题