问题详情:
Ⅰ、下图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无*的X-gal变为蓝*,Ampr为氨苄青霉素抗*基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有
和 。
(2)实验小组用BamHⅠ和BglⅡ两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中。在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝*,说明导入了 。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌 。(填“能”或“不能”)在该培养基上生存。
(3)将若干个质粒和目的基因用BamHⅠ和BglⅡ两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功连接后的产物,获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段,则目的基因的长度为 kb(己知目的基因的长度大于1kb,1kb=1000个碱基对)。
Ⅱ、pBV220质粒是被广泛应用的大肠杆菌载体,结构如下图所示。其中PRPL是启动子,rrB是基因转录终止信号,Ampr是氨苄青霉素抗*基因,ori是质粒复制起点,EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ、PstⅠ均为限制*内酶。回答下列问题:
(1)将目的基因与此质粒构建基因表达载体时,通常用图中 两种限制酶切割此质粒,其优点是 。用这两种酶可以切开此质粒的 个**二酯键。
(2)目的基因是否成功导入大肠杆菌,首先用到的检测方法是 。
【回答】
Ⅰ、(1)氨苄青霉素 X-gal
(2)空质粒(或没有*入目的基因的质粒) 不能
(3)1.8
Ⅱ、(1)EcoRⅠ、HindⅢ(答全得分) 可防止质粒自身环化 4
(2)DNA分子杂交技术
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题