问题详情：
为探究M基因的功能，科研人员将克隆得到的M基因导入拟南芥植株(自交繁殖)，流程如图所示。回答下列问题：
(1)通过过程a、b，采用________________________法来获得大量的M基因，过程b中需先加热至90～95 ℃然后冷却至55～60 ℃，冷却的目的是________________________________________________________________。
(2)为获得转基因植物，采用________法侵染拟南芥的花序。基本过程如下：
①过程d：将重组质粒导入大肠杆菌，其目的是________________。
②过程e：将重组质粒导入农杆菌，再将含有重组质粒的农杆菌离心、富集，得到含有M基因的农杆菌液。
③过程f：在拟南芥植株产生大量花序时，将其花表面部分在农杆菌悬浮液中浸泡20～30 s，3～4周后得到转化拟南芥植株的种子(T0)。浸泡之前，需先剪去已经长成的角果(这些角果将来可发育成种子)，原因是
________________________________________________________________。
④将收获的拟南芥T0种子，播种在含有________的培养基上，能健康生长的幼苗含有________________。
(3)采用农杆菌花序侵染的方法转化，一般只能将目标片段整合到一条DNA上。若要获得M基因稳定的突变体，需________筛选出能稳定遗传的突变体。
【回答】
(1)反转录法(逆转录法)和PCR 使引物结合到互补DNA链上
(2)农杆菌转化 获取大量重组质粒(让目的基因扩增) 这些已受精的角果将来结的种子是非转基因的 卡那霉素 M(目的)基因
(3)将T0代连续自交
解析 (1)图示中由已知RNA获取目的基因的方法是反转录法(逆转录法)，对目的基因进行扩增采用的是PCR技术。进行PCR时需加热至90～95 ℃然后冷却至55～60 ℃，冷却的目的是使引物结合到互补DNA链上。(2)图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌，而是先将其导入大肠杆菌，目的是利用大肠杆菌的增殖来获取大量重组质粒(让目的基因扩增)。适合转化植株的花卉应没有成熟，也没有产生已受精的角果。因为这些已受精的角果将来结的种子肯定是非转基因的，如果不剪掉的话会降低转化率，不利于后续*作。由于质粒中含有卡那霉素抗*基因，成功转入重组质粒的种子能够在卡那霉素培养基上正常生长，非转基因种子不能正常生长，一般萌发后死亡。(3)由于农杆菌介导的花序浸染法一般只能将目标片段整合到一条DNA上，为筛选出能稳定遗传的突变体，可将T0代连续自交。
知识点：生物技术的安全*和伦理问题
题型：综合题
